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Le cours comprend le matériel d’étude et l’examen.

Description : Renforcez vos connaissances à propos du colorant à l'hématoxyline et à l'éosine (H&E) en examinant cette procédure en détail en termes de la théorie, de la pratique, des catégories, de l’utilisation de mordants et de la résolution de problèmes quand les « choses tournent mal ».

Avant de commencer ce cours, l’étudiant aura déjà acquis les connaissances suivantes :

• Reconnaître les aspects microanatomiques des cellules et tissus normaux
• Comprendre les mécanismes de la fixation de tissus et des fixateurs
• Se familiariser avec la manipulation de tissus, le montage et le traitement
• Posséder des connaissances en microtomie, enrobage et coupe de tissus
• Se familiariser avec les techniques de coupes à congélation
• Comprendre la terminologie médicale
• Comprendre les éléments de base des théories de coloration et les termes connexes

Date de commencement : Dès l’inscription

Achèvement : 52 semaines

Résultats d'apprentissage :

• Déclarer l’objectif du colorant à l’hématoxyline et à l’éosine dans la démonstration des tissus
• Identifier et décrire les éléments tissulaires colorés à l’aide de solutions d’éosine
• Décrire les principes de la théorie de coloration d’un colorant H&E
• Nommer une source de coloration naturelle en poudre, soit l’hématoxyline
• Établir la différence entre l’hématoxyline et l’hématéine
• Définir le terme « mordant » et indiquer son utilisation/objectif relativement aux solutions d’hématoxyline
  • Nommer 4 produits chimiques utilisés à titre de mordants
• Décrire la couleur produite par l’hématoxyline avec les divers mordants
  • Fer
  • Aluminium
  • Autres mordants
• Décrire le terme « alun »
• Définir et expliquer l’oxydation (« maturation ») de l’hématoxyline
  • Nommer 4 produits chimiques servant d’oxydants
• Définir/discuter et différencier entre la coloration progressive et régressive à l’hématoxyline
  • Utilisation d’acides faibles
  • Utilisation de mordants
  • Autres réactifs différentiateurs
• Définir le terme « laque »
• Discuter du bleuissement des coupes colorées à l’aluminium-hématoxyline, sous les rubriques suivantes :
  • Principe
  • Mécanisme
  • Résultat
  • Réactifs utilisés
  • pH
• Identifier et décrire les caractéristiques/aspects microscopiques des constituants de tissus colorés; et discuter des propriétés, des avantages, des inconvénients, de l’utilisation et de la composition chimique de ces solutions d’hématoxyline :
  • Harris
  • Gill
  • Mayer
  • Verhoeff
  • Weigert
• Indiquer une cause potentielle et suggérer une technique corrective des problèmes suivants pouvant avoir lieu avec un colorant à l’aluminium-hématoxyline :
  • Coloration uniformément faible des noyaux
  • Noyaux bleu foncé peu détaillés avec un cytoplasme gris-bleu
  • Granules foncés (pourpres) précipités sur les coupes
  • Noyaux colorés rouge terne ou brun
  • Noyaux pâles indistincts ayant peu de détails de chromatine
• Classer l’éosine selon son groupe de coloration et distinguer ce colorant comme étant anionique ou cationique
• Nommer 3 autres colorants couramment utilisés appartenant à la même catégorie que l’éosine
• Différencier entre l’éosine Y et l’éosine B
• Indiquer une cause et suggérer une technique corrective des problèmes suivants pouvant avoir lieu avec un colorant à l’éosine :
  • Coloration uniformément faible du cytoplasme
  • Coloration rougeâtre cachant les détails du colorant nucléaire, avec du cytoplasme/muscle rougeâtre
  • Noyaux bleu foncé avec des détails indistincts et un cytoplasme gris-bleu
  • Stries dans l’éosine
• Énumérer et décrire d’autres causes des anomalies du colorant à l’hématoxyline/l’éosine :
  • Prélèvement d’échantillons
  • Fixation/fixatif
  • Montage
  • Traitement de tissus
  • Microtomie
  • Séchage de lames
  • Déparaffinisation et hydratation
  • Déshydratation, transparisation et lamelle couvre-objet
• Définir le numéro du Colour Index et préciser l’objectif de son utilisation
• Discuter de l’importance des étapes du lavage à l’eau
• Décrire les artéfacts dans une coupe H&E congelée

Auteure : Masaye Tanaka, ART, BSc, MEd

Date de la version : novembre 2018

Heures PEP : 11,5

Crédits EPC : 0,5

À noter : Les heures PEP et/ou crédits CEP ne seront accordés qu’à l’achèvement réussi de l’examen final.